爱必信 CBA法多因子检测试剂盒

摘要：虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术仅能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。再者日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性

虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术仅能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。再者日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法Western Blot等很难检测。爱必信提供CBA法多因子检测试剂盒，提供了更加灵活、简便、高效的微量样本多重检测方案。

原理：

将特定的抗体偶联到特定的具有不同荧光强度的微球表面，制备成为待测因子的捕获微球（Capture Antibody）。将捕获微球与待测样本（血清、血浆或者细胞培养液）进行孵育，此时待测的细胞因子被特定的微球捕获。生物素标记的检测抗体，形成抗体包被微球-细胞因子-检测抗体的免疫复合物，加入藻红蛋白标记的链霉亲和素与生物素结合，通过流式细胞仪检测，获得待测物的荧光强度，荧光强度与样本中因子的含量成正比，最后结合这十二种细胞因子标准品的标准曲线，从而实现对同一份样本中多个因子的定量检测，辅助判断机体的免疫功能状态。

不同指标检测灵敏度：

注：若检测结果超出检测范围，应用标准品/样品/微球稀释液将样本稀释适当的倍数重新检测；若待测样本的检测结果低于检测下限或未检测到，建议直接报告为≤最低检测值。

模版建立方法：

1、微球群分布：

注：微球内部用不同强度的荧光染料染色。

2、模板建立：模板建立可参考：
(1)建立X轴为FSC-H,Y轴为FSC-A的密度图模板，设定门，不包含碎片和黏连的微球，如下图1，P6；
(2)建立X轴为FSC-H、Y轴为SSC-H的线性密度图模板，设定混合微球位置R1,R2,R3，如下图2；
(3)建议两个PE（X轴）和APC(Y轴)的对数密度图模板，分别显示R1门，R2门，R3门内微球，使得微球群能够清楚和明显的分布于散点图上，显示各因子PE荧光强度。如图3，图4，图5。

3、样品的检测结果分析
各标准品及样本依次上机检测，对于每种微球群，应最少获取100个微球。利用标准品梯度作标曲，计算样本检测结果。

CBA应用领域：

炎症因子的水平的分析

肿瘤研究及肿瘤疾病的辅助诊断、疗效和预后监测

系统性红斑狼疮（SLE）和新生儿脓血症等免疫疾病的监控

干细胞研究和干细胞治疗监测

免疫学研究和免疫疾病的辅助诊断和监控

感染疾病的研究及辅助诊断和疗效评价

免疫功能监测

药效评价，药物研发、疫苗研究

CBA与传统的蛋白定量相比有以下优势：
1、微量检测: 一个样本同时检测多个因子，只需25ul。
2、数据更可靠: 多指标来源于同一样本

3、检测速度快：多因子同时检测，无需过夜孵育。
4、灵敏度高：低至1.22pg/mL。

Absin CBA盒子优点：
1、性能好：采用Biotin-SAV信号放大系统，灵敏度更高。
2、磁性微球: 搭配磁标板，操作简单。
3、适用广：与多种流式细胞仪兼容。
4、易分析：免费提供FCAP v3.0分析软件。
5、指标灵活：检测指标可灵活组合。

可自由组合的多因子检测Kit：

Absin现有Kit