摘要：在生物医药研发不断提速的今天，如何更高效、精准地捕捉生物分子之间的相互作用，是机制研究与药物筛选的关键课题。作为一种兼具灵敏度与高通量特性的荧光检测技术，TR-FRET (Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy
转自：ACROBiosystems官方
深入探索生物药开发新宠
TR-FRET
在生物医药研发不断提速的今天，如何更高效、精准地捕捉生物分子之间的相互作用，是机制研究与药物筛选的关键课题。作为一种兼具灵敏度与高通量特性的荧光检测技术，TR-FRET (Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，时间分辨荧光共振能量转移）正在被越来越多的研发人员所青睐。TR-FRET是一种基于荧光共振能量转移（FRET）和时间分辨荧光检测（TRF）的检测技术。这项技术依赖于供体荧光基团和受体荧光基团之间的距离，当供体分子和受体分子彼此靠近时，通过荧光共振能量转移产生信号，同时引入时间延迟监测机制，规避了自发荧光和激发光散射干扰。TR-FRET技术融合了FRET和TRF两种技术的优势，具有灵敏度高、操作简便、结果可靠等特点，不仅适合高通量筛选，还可广泛用于蛋白定量、信号通路研究、疾病机制研究等，成为当前药物开发领域的重要工具。
TR-FRET技术原理
荧光共振能量转移（FRET）：当分子未发生结合，供体与受体距离较远（通常大于10nm），供体被激发后产生的能量无法有效转移给受体，在检测结果中只能观察到供体的发射峰（620nm）；当分子发生结合，供体和受体足够接近（通常距离小于10nm），激发态的供体发生FRET将能量传递给受体，导致受体发光，此时出现665nm信号。
时间分辨荧光检测(TRF)：在激发脉冲结束后，经过一个短暂的延迟时间（通常为50-150微秒）后检测供/受体荧光信号。这一时间延迟可以有效消除来自非特异性背景荧光的干扰。最后通过比较荧光强度信号比率，评估分子间的相互作用强度、亲和力或结合动力学。
TR-FRET技术的演进是伴随着荧光标记技术、蛋白纯化工艺与高性能检测仪器的持续进步的：
20世纪80年代末：FRET作为分子互作的研究工具在生物学中初步应用，但其信噪比低、易受背景干扰的缺点限制了在复杂体系中的应用。
90年代初：科研人员引入稀土金属离子（如铕、铽）作为FRET供体，并结合TRF技术，从而开发出TR-FRET方法，大大提升了检测灵敏度和稳定性。
2000年代初：TR-FRET开始被大规模用于药物高通量筛选（High Throughput Screening, HTS）。
2010年代：随着抗体工程、标签蛋白表达系统的发展，TR-FRET应用更为广泛，包括蛋白互作验证、蛋白降解技术（如PROTAC）功能分析等，成为结构生物学与功能生物学之间的重要桥梁。
当下与未来：借助自动化平台、多功能读板仪的发展，TR-FRET正向更高通量、更低样本量、更精细定量的方向进化。
TR-FRET技术优势
高通量：均相检测，无需分离洗涤步骤
高灵敏度：高信噪比，背景干扰低
微量低耗：小体积反应，节省样本及试剂
重复性好：操作简便，减少实验误差
从原料到应用
ACRO打造专业化TR-FRET产品布局
ACROBiosystems百普赛斯依托在蛋白和抗体开发领域的深厚技术积累，成功打造了高性能TR-FRET技术平台，为生物医药研发提供一站式前沿解决方案。我们提供覆盖多场景应用的TR-FRET试剂盒、高兼容性通用工具及定制化开发服务，帮助客户快速建立高灵敏度、高可靠性的检测体系，显著提升从靶点验证到临床前研究的实验效率，加速创新药物开发进程。
产品优势
高品质的核心原材料
依托成熟的蛋白与抗体开发平台，ACRO 能提供结构天然、构象完好、生物活性高、质控严格的蛋白和抗体原材料，确保每一批试剂都具有稳定的性能。
更丰富的产品矩阵
多样化的产品类型，覆盖多种热门靶点，无论是药物高通量筛选、蛋白定量还是信号通路研究，您都能找到最契合需求的 TR FRET 解决方案。
更有保证的产品质量
经严格质控及多维度验证，每一款TR FRET试剂盒均经过系统的方法学验证，更在多种真实药物开发场景中进行了验证，让您对实验结果更放心。
卓越的性价比
ACRO 充分考虑稀释与移液过程中的试剂损耗，提供超量包装，以更具竞争力的价格为您的长期研究提供持续保障。
灵活的产品选购方案
针对不同实验需求，您既可直接购买完整试剂盒，也可按需选购通用性工具，实现更高的成本控制与实验自由度。同时我们还可根据您的需要，提供个性化的试剂盒定制开发服务。
更多TR-FRET产品持续开发中，敬请期待~
性能数据
检测灵敏度高，样本可选浓度范围大
Inhibition of Europium-chelate labeled human TL1A: FA labeled human DR3 binding by Human Anti-TL1A Neutralizing Antibody. Premix serial dilutions of Human Anti-TL1A Neutralizing Antibody (1:2 serial dilution, from 10 μg/mL to 0.01953125 μg/mL (66.6667-0.1302 nM)) and Human TL1A Protein Europium-chelate and incubate at room temperature (20℃-25℃) for 0.5 hours. Then add FA Labeled Human DR3 Protein and incubate at room temperature (20℃-25℃) for 0.5 hours. Detection was performed with IC50 of 2.816nM. The assay was performed according to the above-described Datasheet (QC tested).
基质效应低，背景影响小，结果更可靠
Verify potential matrix effects by adding different levels of DEME, RPMI1640, FBS and HSA to the Sample Diluted buffer.
应用数据
抑制剂筛选
It shows that both Efgartigimod and its biosimilar, Human IgG1 Fc (C103S, M135Y, S137T, T139E, H316K, N317F) His Tag exhibit good inhibitory activity in this TR-FRET competition assay.
药物抑制作用验证
Inhibition of Europium-chelate labeled Human IgE Fc: FA labeled human Fc epsilon RI alpha binding by Anti-IgE (Omalizumab)Premix serial dilutions of Anti-IgE (Omalizumab) (1:2 serial dilution, from 10 μg/mL to 0.002 μg/mL (66.67-0.016 nM)) and Human IgE Fc Protein Europium-chelate and incubate at room temperature (20℃-25℃) for 0.5 hours. Then add FA Labeled Human Fc epsilon RI alpha Protein and incubate at room temperature (20℃-25℃) for 0.5 hours. Detection was performed with IC50 of 0.7155nM. The assay was performed according to the above-described Datasheet (QC tested).
抗体半衰期评估
The half-lives of these 3 monoclonal antibodies currently in clinical use generally correlate with the binding affinity to FcRn. The kit has been used to detect 3 FDA approved antibody drugs of different binding affinity to FcRn, and the IC50 trend is consistent with affinity constant from SPR as well as the actual in vivo half-life published.
与FDA批准的抗体药物的结合验证
The kit has been used to detect four FDA approved antibody drugs with different affinities binding to human CD64. Bevacizumab, Toripalimab, and Efgartigimod alfa bind to human CD64 with the nanomolar affinity. The Fc of Eculizumab has been modified into the human IgG2 hinge region and human IgG4 CH2-CH3 region, so it doesn’t bind to human CD64.
TR-FRET试剂盒定制开发服务
助力新药开发更进一步
为更好地满足生物医药领域伙伴日益多样化的药物开发需求，ACROBiosystems百普赛斯推出专业的TR-FRET试剂盒定制开发服务。无论您聚焦于药物筛选、定量检测还是蛋白互作研究等应用场景，ACRO都能为您量身打造精准、高效的TR-FRET解决方案，助力新药研发提速增效！
来源：新浪财经