默克生命科学样品制备篇 | 实验秘籍在手，WB实验不用愁

摘要：Western Blotting蛋白质免疫印迹是一种常用的蛋白检测和定量的结束，它可以从复杂的蛋白质混合物种分离和检测某种特定的目标蛋白，已成为非常经典、有效的蛋白研究方法。想了解生物技术研究、开发和生产内容可以去默克www.sigmaaldrich.cn查看

Western Blotting蛋白质免疫印迹是一种常用的蛋白检测和定量的结束，它可以从复杂的蛋白质混合物种分离和检测某种特定的目标蛋白，已成为非常经典、有效的蛋白研究方法。想了解生物技术研究、开发和生产内容可以去默克www.sigmaaldrich.cn查看。

然而虽然实验原理简单，想要做成漂亮的结果却很不容易。尤其是在低丰度蛋白的检测。低丰度蛋白由于浓度较低，在WB检测中经常遇到检测信号弱、甚至检测不到信号，是WB检测中最常见到的挑战。

那么如何提高低丰度蛋白的检测成功率呢？

掌握以下3点：

1) 有效的样品制备方案，提高目的蛋白的含量

2) 正确选择转印膜，改善低丰度蛋白结合率

3) 使用高灵敏度底物和增强剂，增强检测信号

今天我们就先来说说如何优化样品制备方案，提高目的蛋白的含量，事半功倍地提高低丰度蛋白的检测成功率。

提高得率

优化细胞裂解液

BugBuster® Master混合试剂，包含温和提取配方BugBuster®裂解液、破坏细胞壁增强蛋白释放的rLysozyme™溶液、降低粘度改善操作的Benzonase®核酸酶，提供方便、一体化的蛋白提取试剂，无需超声，最大限度提高蛋白得率。

强大：综合BugBuster®裂解液、Benzonase®核酸酶和rLysozyme™解决方案

通用：广泛裂解革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌

高效：最大限度回收活性、可溶性蛋白

温和：不变性可溶性蛋白

可用于制备高纯度的包涵体

兼容蛋白酶和磷酸酶抑制剂

BugBuster® Master一体化蛋白提取试剂混合物，获得最高蛋白得率

默克提供针对不同物种优化的细胞裂解试剂，可访问官网了解更多详情Sigmaaldrich.cn/cell-lysis

蛋白酶抑制剂保护蛋白

ReadyShield® 抑制剂cocktail采用无冻配方，随时取用，为不同物种和样本进行优化，广泛抑制丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、酸性蛋白酶和氨肽酶、磷酸酶等。

使用便利：-20°C储存不结冻，随用随取

优化配方：针对不同物种细胞和组织进行优化

广泛验证：经过多种样品类型检测，包括人胎盘组织、牛肝脏组织、A431、U937细胞提取物等

有效抑制蛋白酶活性

配方及选择指南

蛋白富集

细胞器蛋白分部提取富集

ProteoExtract亚细胞蛋白质组抽提试剂盒(S-PEK)专门用于从一个哺乳动物细胞和组织样品中快速高效地按亚细胞结构分离四种不同的蛋白。蛋白产物可用于1D/ 2D PAGE、酶活分析（包括激酶活性分析）、蛋白定位研究、芯片检测（Microarray）、（非变性）胶电泳、免疫印迹及其它分析，如：ELISA等。