摘要：蛋白产量：通过测定重组蛋白的产量来评估表达系统的效率。可以使用如酶联免疫吸附试验（ELISA）、Western blot等方法来定量分析重组蛋白的表达量。

评估昆虫杆状病毒表达系统（BEVS）蛋白表达系统的优化效果，可以从以下几个方面进行：

蛋白产量和质量：

蛋白产量：通过测定重组蛋白的产量来评估表达系统的效率。可以使用如酶联免疫吸附试验（ELISA）、Western blot等方法来定量分析重组蛋白的表达量。

蛋白质量：通过质谱、圆二色谱（CD）、傅里叶变换红外光谱（FTIR）等技术来评估重组蛋白的折叠、组装和翻译后修饰情况。

启动子和增强子的优化：

评估不同启动子和增强子组合对蛋白表达的影响。例如，orf46、pH和p10等启动子在联合作用时可能表现出相加效应，可以通过实验比较不同组合的表达效果。

感染复数（MOI）和病毒滴度：

利用Titer Estimation for Quality Control (TEQC)方法来估算初始感染性和滴度/MOI值，这些值可以用来定量优化蛋白表达。

细胞宿主的工程：

评估工程化细胞宿主对蛋白表达的影响。例如，通过RNAi技术降低Caspase-1的表达，或者通过稳定应用RNAi技术降低凋亡基因表达，从而增加重组蛋白的产量。

基因编辑和调控：

评估通过基因编辑和调控途径对蛋白表达的影响。例如，通过删除非必需基因或添加有益基因来增强蛋白质的表达，如抗凋亡基因P35的引入。

分泌和稳定性：

评估重组蛋白的分泌能力和稳定性。例如，通过引入极性氨基酸天冬氨酰胺促进重组蛋白的分泌。

成本效率：

估算1L生产量的可消耗品成本，包括培养基、转染试剂、一次性烧瓶、质粒准备、细胞维护、病毒生产、细胞计数等，以评估系统的成本效率。

易用性和速度：

评估从质粒DNA/表达构建到生物量（表达的蛋白质）处理所需的时间和所需的经验/训练水平。

通过上述多维度的评估，可以全面了解BEVS蛋白表达系统的优化效果，并为进一步的优化提供科学依据。

来源：全球钓鱼一点号