Y染色体微缺失是导致男性不育的重要遗传学因素

摘要：遗传医学中心主管技师张燕、邵芳成功在中科院分区二区Microchemical Journal期刊上发表了题为《Establishment and evaluation of rapid detection of AZFc deletion on Y chrom

遗传医学中心主管技师张燕、邵芳成功在中科院分区二区Microchemical Journal期刊上发表了题为《Establishment and evaluation of rapid detection of AZFc deletion on Y chromosome based on multienzyme isothermal rapid amplification》的文章，影响因子4.9。

Microchemical Journal

研究成果

Y染色体微缺失是导致男性不育的重要遗传学因素，无精子症因子（Azoospermia factor，AZF）位于Y染色体长臂上，分为AZFa、AZFb、AZFc三个区域，其中AZFc区的缺失率最高，该区缺失的患者其精子质量从无到正常，且精子数量会随着年龄的增长呈进行性下降趋势。

临床上针对Y染色体微缺失的检测方法主要有多重实时荧光PCR（Real-time fluorescent quantitative PCR，RT-qPCR）法和多重连接依赖探针扩增技术（Multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA），这两种方法由于检测环境要求高及检测耗时长的限制，使得Y染色体微缺失很难在基层医院开展，导致缺失患者不能得到及时检测。

本研究在多酶恒温快速扩增（Multienzyme isothermal rapid amplification，MIRA）技术的基础上结合实时荧光技术和侧流层析试纸条（Lateral flow dipstick，LFD )技术开发了两种快速检测AZFc区缺失的新方法：三重实时荧光（RT-MIRA）法（实时显示扩增曲线）、三重侧流层析试纸条（MIRA-LFD）法（将扩增产物稀释后加入三重核酸检测试纸条中进行显色，5 ~ 15min内判读结果）。这两种方法只需39℃恒温15 ~ 20 min即可完成扩增，具有灵敏度高、特异性强、可靠、快速、经济等优点，适用于包括基层单位在内的医疗机构使用，方便广大男性及早进行AZFc区检测。

本研究选取了AZFc区的两个检测位点sY254、sY255位点，选取Y染色体短臂上性别决定基因（Sex-determining region of Y chromosome，SRY）作为内对照位点，分别设计各位点的RT-MIRA法和MIRA-LFD法的引物和探针，同时设计各位点的质粒模板序列，通过引物和探针浓度优化分别构建三重RT-MIRA法和三重MIRA-LFD法反应体系。