磷酸化蛋白检测避坑全指南：从样品到 WB 的硬核操作手册
蛋白磷酸化作为信号通路研究的 "黄金指标"，其检测堪称科研人必修的 "显微镜级" 技术活。Western blot 虽为常规手段，但磷酸化检测的特殊性，让每个环节都藏着 "翻车风险"。今天就来拆解这套 "高难度动作" 的正确打开方式 ——
磷酸化抗体
百泰派克：磷酸化位点的鉴定
这是磷酸化位点鉴定中最常用也是最强大的技术。通过使用特定的酶（如胰蛋白酶）消化蛋白质，然后利用质谱仪分析产生的肽段，可以鉴定出磷酸化的氨基酸残基。质谱可以提供关于磷酸化位点位置以及磷酸化水平的定量信息。磷酸化肽的富集是这一步骤中的关键，通常通过亲和层析法（如钛