百泰派克生物科技:质谱检测gly-gly 泛素化

360影视 日韩动漫 2025-04-04 11:21 2

摘要:Gly-Gly 泛素化是一种特定的蛋白质翻译后修饰,即泛素(Ubiquitin)与目标蛋白质连接的过程。泛素是一种小的调节性蛋白,可以通过其C末端的甘氨酸(Glycine)残基与目标蛋白质的赖氨酸(Lysine)残基形成共价键。这种共价连接称为泛素化(Ubiq

Gly-Gly 泛素化是一种特定的蛋白质翻译后修饰,即泛素(Ubiquitin)与目标蛋白质连接的过程。泛素是一种小的调节性蛋白,可以通过其C末端的甘氨酸(Glycine)残基与目标蛋白质的赖氨酸(Lysine)残基形成共价键。这种共价连接称为泛素化(Ubiquitination)。

在蛋白质的泛素化过程中,通常会形成一个泛素链,泛素自身的一个赖氨酸残基(通常是K48或K63)与另一个泛素的C末端甘氨酸形成连接。当这种泛素链连接到目标蛋白上时,它可以改变该蛋白的功能、位置或稳定性,通常导致其被降解。

在蛋白质降解过程中,泛素链会被去泛素化酶(Deubiquitinases)切割并回收,留下目标蛋白上的Gly-Gly修饰。Gly-Gly标记可以通过质谱分析检测到,在质谱分析过程中,研究人员可以利用Gly-Gly修饰来识别和定量泛素化蛋白。通常,蛋白质样本会先经过消化,然后通过质谱进行分析,以识别特定的肽段和其上的翻译后修饰。

1、样品准备:

收集包含目标蛋白的细胞或组织样本。这些样本通常会经过裂解,以提取其中的蛋白质。

2、蛋白质消化:

将提取的蛋白质样本进行酶解消化,通常使用胰蛋白酶。这一步骤将蛋白质分解成较短的肽段。

3、肽段的富集:

由于Gly-Gly标签较小,直接检测可能较困难。因此,需要使用特定的亲和层析技术,如抗Gly-Gly抗体,来富集带有Gly-Gly修饰的肽段。

4、质谱分析:

将富集的肽段进行质谱分析。在这一步,肽段被电离,然后在质谱仪中按照质荷比分离。这允许检测和识别具有Gly-Gly修饰的特定肽段。

5、数据分析:

使用专门的软件分析质谱数据,以识别和定量含有Gly-Gly修饰的肽段。这些数据有助于了解泛素化在不同生物学过程中的作用。

来源:苗苗聊科学

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