标签抗体:直击您的靶蛋白

摘要:蛋白质是生命活动的主要执行者,是我们探索生命机制、疾病机理的重要基石。在靶蛋白结构、功能或定位研究时,需要我们使用抗体来对其进行检测。实验过程中我们常会遇到一些难题,如靶蛋白无特异性抗体、不稳定易降解、内源表达水平低等。

蛋白质是生命活动的主要执行者,是我们探索生命机制、疾病机理的重要基石。在靶蛋白结构、功能或定位研究时,需要我们使用抗体来对其进行检测。实验过程中我们常会遇到一些难题,如靶蛋白无特异性抗体、不稳定易降解、内源表达水平低等。

将多肽或蛋白作为标签,与靶蛋白融合表达可以极大的解决上述问题。蛋白标签应运而生,增加靶蛋白的化学或物理属性,如光敏性、亲和性等,使靶蛋白更容易被分离纯化、检测定位,免疫分析更加便利和通用。

标签抗体广泛用于靶蛋白的定性、定量和定位研究。标签抗体能够与靶蛋白上的标签特异性结合,如今已成为信号转导、功能研究、蛋白纯化中常用工具,主要应用有免疫(共)沉淀、免疫印迹、酶联免疫、免疫荧光、流式细胞等检测实验。

热门标签及其标签抗体

(1)DYKDDDDK标签--抗DYKDDDDK标签抗体

DYKDDDDK(结合Flag®标签)是一种常见的通用标签,构建于靶蛋白的N端或C端。具有高亲水性,标签蛋白纯化不需要变性处理,位于蛋白表面更容易和抗体结合。因此DYKDDDDK抗体也被广泛应用,如检测带有DYKDDDDK标签蛋白的表达情况、细胞定位,以及纯化、定性检测标签蛋白。

Anti-DYKDDDDK mouse monoclonal antibody at 1:1000 dilution. Sample: Recombinant Protein, 10ng/lane, Lane A to K: Proteins with C-terminal FLAG® Tag, Lane L & N: Proteins with

N-terminal FLAG® Tag, Lane O: Protein without FLAG® Tag.

(2)HA标签--抗HA标签抗体

HA标签源自人流感病毒血凝素蛋白的表面糖蛋白的肽序列(YPYDVPDYA),可位于蛋白质的C端或N端。HA标签已被广泛用于多种细胞类型。HA标签抗体特异性识别带有HA标签的融合蛋白,快速获得靶蛋白的定位、表达或生物学功能相关信息。HA抗体也可以固定在琼脂糖凝胶或磁珠上用于蛋白纯化。

(3)Myc标签--抗Myc标签抗体

Myc标签是一个具有11个氨基酸的短肽(序列为:EQKLISEEDL),成功用于检测重组蛋白在细胞中的表达。研究人员通常利用抗Myc标签的抗体与含有Myc标签的蛋白质结合,实现蛋白质的检测和纯化目的,用于WB、IP、IF和FCM等免疫实验。

Anti-Myc Tag mouse monoclonal antibody at 1:5000 dilution. Lane A: GST-myc(Recombinant protein) (5ng). Lane B: GST-myc(Recombinant protein) (1ng). Lane C: myc-GST(Recombinant protein) (100ng). Lane D: myc-GST(Recombinant protein) (20ng).

(4)His标签--抗His标签抗体

His标签一般由6个组氨酸组成,是专门为重组蛋白纯化而设计,是目前靶蛋白纯化的首选。His抗体同样具有重要应用,能够检测带有His标签融合表达蛋白的表达情况、确定其在细胞内的定位,以及其它定性或定量检测。

(5)GST标签--抗GST标签抗体

谷胱甘肽S-转移酶(GST)相对分子量较大,约为26kD,可插入目的蛋白的C端或N端。GST不仅能增加目的蛋白的可溶性,还能提高蛋白在大肠杆菌中的表达量。可用抗GST标签抗体对GST进行检测。

义翘神州抗GST抗体(货号:11213-MM01)可以检测微量GST融合蛋白

(6)GFP标签--抗GFP标签抗体

GFP是绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein)的英文简写,在受到蓝色波长范围的光线激发后,会发出绿色荧光。GFP或它的突变体EGFP可以用来检测基因表达效率,也可以插入靶蛋白融合表达。GFP抗体同样用来检测蛋白的表达情况、确定细胞内的定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白。

来源:健康小道理

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