一劳永逸,无需组织培养实现可遗传基因组编辑,最高可达100%

360影视 欧美动漫 2025-04-08 15:38 5

摘要:近日,Plant JouRNAl在线发表题为“Heritable virus-induced germline editing in tomato”的研究论文,本文报道了一种基于病毒诱导的可遗传基因组编辑(VIGE)方法在番茄(Solanum lycopers

近日,Plant JouRNAl在线发表题为“Heritable virus-induced germline editing in tomato”的研究论文,本文报道了一种基于病毒诱导的可遗传基因组编辑(VIGE)方法在番茄(Solanum lycopersicum)中的成功应用。

研究团队构建了三种转基因番茄品系,分别通过不同启动子(CaMV 35S、SRPSSA、SYAO)驱动SpCas9的表达,并利用烟草脆裂病毒(TRV)递送与移动RNA序列融合的gRNA。通过靶向番茄的Phytoene desaturaseSIPDS)和Downy mildew resistance 6SIDMR6)基因,评估了体细胞和种系编辑效率。研究发现:

启动子选择:SYAO启动子驱动的SpCas9在种系编辑中表现最佳,而35S和SRPSSA启动子未能产生可遗传突变。

环境优化:降低光照强度(282–1053 μmol m⁻² s⁻¹)显著提高了可遗传编辑效率(从0%提升至86%-100%),并诱导了双等位突变。

病毒系统有效性:TRV递送gRNA结合移动RNA序列(如拟南芥突变型mFT)成功实现了番茄种系编辑,且编辑后代无病毒残留,确保了安全性。


SYAO启动子的关键作用:SYAO启动子因在分生组织、胚胎等活跃分裂组织中特异性表达SpCas9,是实现高效可遗传编辑的核心因素。

环境因素的重要性:高光照抑制病毒向生殖组织的移动,降低光照可显著提升编辑效率,表明光强管理是优化VIGE的关键。

无需组织培养:一旦建立SpCas9转基因番茄品系,仅需病毒递送gRNA即可生成可遗传突变体,省去了传统转化和再生步骤。

首例番茄高效可遗传病毒编辑:首次在番茄中通过病毒载体(TRV)实现高效、稳定的种系基因组编辑,为番茄及其他作物的基因改良提供了新工具。

启动子与环境协同优化:通过SYAO启动子与光照条件调控的结合,将可遗传编辑效率从3%提升至100%,突破了此前番茄中编辑效率低的技术瓶颈。

跨物种技术验证:验证了移动RNA序列(如mFT)在番茄中的适用性,扩展了病毒诱导编辑系统的应用范围。

简化流程:该方法避免了繁琐的组织培养步骤,仅需病毒侵染即可获得可遗传突变体,显著降低了技术门槛和时间成本。


总结:本文通过启动子筛选和环境优化,开发了一种高效、便捷的病毒诱导番茄基因组编辑系统,为作物精准育种提供了重要技术突破。

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来源:小齐的科学讲堂

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