摘要:AbMole蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)是一种低毒,全面的蛋白保护试剂,最大限度地保护蛋白免受蛋白酶降解,提高蛋白得率。本品可用于蛋白免疫印迹 (WB)、免疫共沉淀 (Co-IP)、pull-down、免疫沉淀 (IP)
AbMole蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA,100X DMSO储液)是一种低毒,全面的蛋白保护试剂,最大限度地保护蛋白免受蛋白酶降解,提高蛋白得率。本品可用于蛋白免疫印迹 (WB)、免疫共沉淀 (Co-IP)、pull-down、免疫沉淀 (IP)、免疫组织化学 (IHC)、免疫荧光 (IF)、酶学研究等多种与蛋白相关的实验。
1.成分与作用机制
蛋白酶抑制剂Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail)是一种实验室常用的混合物,通过抑制多种蛋白酶的活性,保护目标蛋白在提取或分析过程中不被降解。其核心成分涵盖针对不同蛋白酶家族的抑制剂,例如丝氨酸蛋白酶抑制剂(如AEBSF、Aprotinin)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(如E-64、Leupeptin)、天冬氨酸蛋白酶抑制剂(如Pepstatin A)以及氨肽酶抑制剂(如Bestatin)。部分产品还添加金属蛋白酶抑制剂(如1,10-Phenanthroline),通过可逆或不可逆结合机制全面阻断蛋白酶活性,确保蛋白质的完整性和实验结果的可靠性。
2.应用领域
该混合物广泛应用于蛋白质相关实验,包括Western Blot、Co-IP、Pull-down等,可防止靶蛋白降解,提升检测灵敏度;在免疫荧光或免疫组化中则能维持蛋白结构,增强信号强度。此外,它在激酶活性测定或组织培养基中也有重要应用,例如抑制分泌型蛋白的降解以维持样本质量。
3.试剂形式使用与优势
蛋白酶抑制剂Cocktail通常以溶液或片剂形式提供。溶液型需按比例稀释(如1:100)后加入裂解液,并储存于-20°C;片剂则溶于缓冲液即可使用,便于运输和保存。其优势在于广谱性、兼容性(部分不含EDTA,适用于金属依赖蛋白实验)和操作便捷性,但需注意高浓度DMSO的细胞毒性风险,以及特定蛋白酶(如去泛素化酶)可能未被常规抑制剂覆盖的情况。
选择时可根据实验需求决定剂型:溶液型适合精确控制浓度,而片剂更适合快速操作;若涉及金属依赖蛋白纯化,需选用无EDTA版本。合理使用此类抑制剂可显著提升实验重复性。
来源:AbMole