「干冰」抗泛素单克隆抗体(克隆VU-1,识别多泛素化和单泛素化蛋白

360影视 日韩动漫 2025-05-28 17:17 3

摘要:泛素(Ub)是一种高度保守的8kDa多肽,存在于所有真核细胞中。它通过三种酶的顺序作用与目标蛋白的赖氨酸残基的ε-氨基结合,这三种酶分别是E1泛素激活酶、E2结合酶和E3连接酶。此外,泛素本身包含的七个赖氨酸残基也可以作为泛素的受体,从而形成多泛素链。在这些连

泛素(Ub)是一种高度保守的8kDa多肽,存在于所有真核细胞中。它通过三种酶的顺序作用与目标蛋白的赖氨酸残基的ε-氨基结合,这三种酶分别是E1泛素激活酶、E2结合酶和E3连接酶。此外,泛素本身包含的七个赖氨酸残基也可以作为泛素的受体,从而形成多泛素链。在这些连接方式中,K48和K63连接方式已被充分研究。K48连接的多泛素化会靶向蛋白质进行蛋白酶体降解,而K63连接则调节信号事件、受体内吞和免疫反应。其他赖氨酸残基上的多泛素连接则不太显著,其生理功能仍大多未知。

LifeSensors开发了VU-1泛素单克隆抗体,能够识别多泛素化和单泛素化蛋白以及游离泛素。VU-1已被证明可以识别K48、K63、K11连接以及线性泛素链;其他连接方式尚未经过测试。

应用:

Western blot(1:1000)请参阅下方协议。

ELISA、IHC(1:200–1:500)

所有应用的最佳条件应由最终用户自行确定。

亚型:IgG1(小鼠源)

纯度:>90%

克隆号:VU-1

提供形式:0.5mg/ml,PBS缓冲液,pH 7.2

特异性:抗体能够检测被多泛素化和单泛素化修饰的蛋白、线性泛素链以及游离泛素。由于泛素在真核生物中高度保守,抗体的反应性与物种无关。

规格:250ug,足以用于50次以上的Western blot实验。

储存:-20℃保存。避免反复冻融。

[干冰]抗泛素单克隆抗体(克隆VU-1)图片:

左图:Western blot分析链特异性和细胞泛素化偶联物,使用单克隆抗体VU-1。(A)K48、K63和K11连接的多泛素化偶联物;(B)40µg HEK293T细胞裂解物(50nM硼替佐米处理);(C)OLN细胞未处理(对照)和1µM MG132处理。细胞裂解物经SDS-PAGE分离后,使用VU-1抗体(B.1µg/ml;C.0.2µg/ml)进行免疫印迹。

右图:VU-1单克隆抗体在ELISA中检测未结合的泛素。未结合的泛素被涂覆在聚苯乙烯板上,封闭后与VU-1或FK2抗体(1µg/ml)孵育,随后加入抗小鼠HRP偶联物(1:5000)。加入ECL后,使用Envision平板阅读器读取结果。

文献参考:

1 Wilkinson, K.D., Regulation of ubiquitin-dependent processes by deubiquitinating enzymes. Faseb J, 1997. 11:1245-56.

2 Meulmeester E, et al Loss of HAUSP-mediated deubiquitination contributes to DNA damage-induced destabilization of Hdmx and Hdm2. Mol Cell.2005 18:565-76.

3 Faustrup H, et al. USP7 counteracts SCFbetaTrCP- but not APCCdh1-mediated proteolysis of Claspin. J Cell Biol. 2009 184:13-9.

4 Li M,et al. Deubiquitination of p53 by HAUSP is an important pathway for p53 stabilization Nature, 2002 416:648-53.

5.Seiberlich V. et.al. The small molecule inhibitor PR-619 of deubiquitinating enzymes affects the microtubule network and causes protein aggregate formation in neural cells: Implications for neurodegenerative diseases. Biochem et Biophys Acta, 2012, 1823;2057-2068.

来源:科学探究员

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