摘要:通用技术环球医疗西电集团医院医学检验科引进的BECKMAN COULTER公司流式细胞仪DxFLEX,拥有3个激光器,最高支持11种荧光素同时检测,可以全面覆盖临床及临床科研的检测需求。
通用技术环球医疗西电集团医院医学检验科引进的BECKMAN COULTER公司流式细胞仪DxFLEX,拥有3个激光器,最高支持11种荧光素同时检测,可以全面覆盖临床及临床科研的检测需求。
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种对单细胞或生物颗粒进行多参数、定量分析的技术,具有速度快、精度高、准确性好等优点。目前FCM广泛应用于临床医学,在疾病的预防、诊断、治疗及预后判断中具有重要作用。
应用此检测技术,目前可常规开展的检验项目有:淋巴细胞亚群分析及绝对计数检测、人类白细胞抗原B27检测、调节T细胞检测、中性粒细胞CD64感染指数检测、PD-1检测、B细胞精细亚群检测(具体项目、检测时间和注意事项待定)。
淋巴细胞亚群分析及绝对计数检测
此项目检测包括 CD3+T 淋巴细胞、 CD3+CD4+ 辅助/诱导T淋巴细胞、CD3+CD8+ 抑制/杀伤 T 淋巴细胞、CD3-CD19+B 淋巴细胞和 CD3- (CD16+CD56)+NK 淋巴细胞,简称为 TBNK。
淋巴细胞亚群中的 T 细胞、B 细胞和自然杀伤(NK)细胞即 TBNK 淋巴细胞是人体重要的免疫细胞,是机体免疫力的重要组成部分。而“免疫力”指机体抵抗外来侵袭,维护机体内环境稳定,清除变异物质的基本能力,是机体健康的基石。目前,TBNK 淋巴细胞检测已全面应用于艾滋病、严重急性呼吸综合征(SARS)、慢性乙型肝炎、手足口病、Epstein‑Barr 病毒(EBV)感染、流行性出血热等多种感染性疾病患者的免疫评估及诊治,也逐渐成为自身免疫病、肿瘤、器官移植、血液系统疾病、重症监护医疗、老年医学及保健等学科的免疫监测辅助工具。
人类白细胞抗原B27检测
此项目通过检测淋巴细胞表面 HLA-B27 抗原表达来判断阴阳性。
HLA-B27是人体白细胞抗原,是HLA-B27基因(属于Ⅰ型MHC基因)表达的产物,基本上在机体中所有有核的细胞上均表达,尤其是淋巴细胞的表面含量丰富。HLA-B27检测主要用于成人:诊断脊柱关节病(SpA) 中轴型及外周型,国际脊柱关节病评估工作组(ASAS)已将其列为一个重要的诊断指标;16岁以前青少年儿童:幼年脊柱关节病(JuSpA)的重要诊断指标,约90%患者B27阳性,约1/5患者有家族史且均发生在B27阳性家系中。其中,脊柱关节病(SpA)以强制性脊柱炎阳性率最高,约占90%,其他如反应性关节炎、炎症性肠病关节炎、银屑病关节病、未分化脊柱关节病、急性前葡萄膜炎(虹膜炎)也有不同程度的阳性约在35%到80%之间,极少部分健康人约小于等于8%也会出现阳性。强制性脊柱炎诊断与治疗骨科专家共识:筛查强制性脊柱炎,关键在早期诊断及合理、及时治疗,有助于控制病情进展、降低致残率,提高生活质量。
调节T细胞检测
此项目检测的是CD4+T细胞的一个亚群调节性T细胞,简称Treg(CD3+CD4+CD25 highCD127low)。
调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一类具有诱导免疫耐受的免疫调节细胞,通过控制和协调体内效应性T细胞、肥大细胞、树状细胞及B细胞等的免疫反应,保持免疫细胞之间的平衡,下调机体对外来或自身抗原的应答水平。Treg细胞能够分泌IL-10、TGF-β等细胞因子,其异常表达会打破Th1、Th2、Th17与Treg的动态平衡,Treg 抑制自身免疫反应和炎症,维持人体免疫稳态,防止自身免疫性疾病发生发展的重要细胞亚群,还具有减弱机体对肿瘤和感染免疫反应的作用。
中性粒细胞CD64感染指数检测
此项目通过检测外周血中性粒细胞CD64的表达情况,可得出中性粒细胞CD64感染指数(nCD64)。
CD64作为感染性疾病良好的诊断标准,在临床上具有广泛的应用前景。CD64是可以识别免疫球蛋白的IgG Fc片段I型受体(FcγR1),对IgG单体具有高亲和力,介导体液免疫和细胞免疫,对感染性疾病具有早期诊断价值。正常情况下,中性粒细胞表面几乎不表达CD64。当机体患感染性疾病后4-6小时中性粒细胞表面CD64表达迅速升高,CD64表达可增强中性粒细胞功能,包括细胞吞噬功能。CD64可通过抗体依赖性细胞毒作用、细胞吞噬作用和免疫复合物清除作用实现对病原微生物的清除,可做为感染性疾病良好的诊断标准。与革兰阳性细菌相比,革兰染色阴性细菌感染时中性粒细胞的CD64表达更高。
PD-1检测
此项目检测T细胞的同时可以检测T细胞上表达PD-1的情况,包括CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4+PD-1+、CD3+CD8+PD-1+。
程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)是T细胞负性调节的重要免疫抑制分子之一,通过向下调节免疫系统对人体细胞的反应,以及通过抑制T细胞炎症活动来调节免疫系统并促进自身耐受,并且PD-1和PD-L1结合启动T细胞的程序性死亡,使肿瘤细胞获得免疫逃逸。因此,检测外周血PD-1水平可评估肿瘤患者的病情以及感染,PD-1表达越高,提示T细胞免疫耗竭越严重。
B细胞精细亚群检测
此项目检测包括CD19+B细胞、CD20+B 细胞、CD5+B 细胞、CD27-B细胞、CD27+B细胞、浆母细胞(CD19+CD27hiCD38hi)。
B细胞通过产生抗体介导体液免疫应答,可通过提呈可溶性抗原激活T细胞,也可通过分泌抑制性细胞因子(如IL-10、TGF-β)或Breg亚群调控免疫反应,参与感染防御、自身免疫病及肿瘤等病理过程的免疫平衡。B细胞作为免疫系统的核心成员,其分化发育历经多个关键阶段。B 细胞来源于骨髓,并在外周淋巴组织中分化、成熟。具体来说,骨髓中的造血祖细胞分化为过渡期 B 细胞,然后在外周组织中进一步发育为成熟的 B 细胞。此项目可区分初始B细胞、记忆B细胞、浆母细胞等B细胞精细亚群,监测B淋巴细胞精细亚群检测项目可以分析B淋巴细胞的成熟阶段,从而帮助我们准确了解自身的体液免疫状态,反应自身免疫性疾病预后,评估造血干细胞移植后B细胞亚群的重构以及监测免疫治疗如利妥昔单抗、抗CD38 抗体(如达雷妥尤单抗)或抗B细胞刺激因子BLyS单抗(如贝利尤单抗)的疗效中具有重要临床意义。因此,B细胞各亚群的动态平衡是免疫健康的核心,其分化异常与感染、肿瘤、自身免疫病等疾病的发生。
来源:西电集团医院