摘要：CD40是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，主要表达于抗原呈递细胞（如B细胞、巨噬细胞和树突状细胞）表面。其配体CD40 Ligand则主要表达于活化的T细胞表面。二者之间的相互作用在免疫反应中至关重要，特别是在B细胞激活、抗体生成以及炎症细胞（如
转自：ACROBiosystems官方
CD40是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，主要表达于抗原呈递细胞（如B细胞、巨噬细胞和树突状细胞）表面。其配体CD40 Ligand则主要表达于活化的T细胞表面。二者之间的相互作用在免疫反应中至关重要，特别是在B细胞激活、抗体生成以及炎症细胞（如巨噬细胞和淋巴细胞）的增殖中发挥关键作用。此外，CD40-CD40L信号通路还参与了多种病理过程，包括自身免疫病、炎症性疾病、癌症等。
CD40-CD40L的传统研究与应用
目前，针对CD40/CD40L的药物开发主要集中在单克隆抗体上。大多数抗体研究都聚焦于CD40激动剂（Agonists）和拮抗剂（Antagonists）。激动剂主要用于肿瘤领域的治疗，而拮抗剂则被探索用于治疗自身免疫性疾病等病症。在过去二十年中，由于剂量限制性副反应的影响，CD40激动剂的研发进展缓慢，导致包括罗氏、艾伯维和诺华在内的多家大型药企在这一领域遭遇挫折，如罗氏的CD40单抗selicrelumab因副作用过大已被剔除管线。这些大药企在肿瘤治疗方面的失败后，转向自身免疫病领域寻求突破。优时比与渤健联合开发的Dapirolizumab Pegol已进入针对系统性红斑狼疮（SLE）的III期临床试验，并在中国获批临床。赛诺菲与ImmuNext合作开发的Frexalimab在多发性硬化（MS）和I型糖尿病的II期试验中显示良好疗效和耐受性，并在中国启动III期临床试验。信达生物的IBI355也在原发性干燥综合征患者中启动I期临床试验，为国内免疫治疗领域带来新突破。这些进展为多种自身免疫疾病的治疗提供了新的希望。此外，小干扰RNA（siRNA）和融合蛋白与多肽等新一代分子治疗也正在开发中，旨在减少CD40蛋白表达或结合不同靶点以提高疗效。
新兴的双特异性激动剂
在这一背景下，Aman Mebrahtu等人的研究开发了一种新型的双特异性CD40激动剂抗体BiA92_HF，该抗体可以快速形成抗体-多肽偶联物（ADAC）偶联物，旨在促进多肽抗原递送到CD40表达细胞，同时结合CD40激动活性，从而增强T细胞增殖和抗肿瘤免疫反应。研究团队利用噬菌体展示技术筛选出新型的人类CD40激动剂，并将其重新格式化为IgG2亚型的全长抗体。实验结果表明，BiA92_HF在体外能够激活树突状细胞和B细胞，在体内能够诱导CD8+和CD4+ T细胞的特异性增殖，增殖倍数分别为10-15倍和2-7倍。在小鼠肿瘤模型中，BiA92_HF显示出显著的治疗效果和提高的安全性，能够完全清除肿瘤，并对肿瘤生长产生远处影响。与临床评估的抗CD40激动剂抗体selicrelumab相比，BiA92_HF与pTag9aa-E744-62联合治疗组的总体生存率显著提高，且未引起明显的体重下降或肝毒性。这项研究为未来的临床研究提供了有力的证据，表明BiA9*2_HF作为一种新型的双特异性CD40激动剂抗体，具有改善T细胞增殖和抗肿瘤免疫反应的潜力，且在多个物种中显示出低毒性特征。
技术的主要工作流程和优势概述
神经疾病中的潜力
近年来，随着科学研究的不断深入，CD40及其配体CD40L的角色已经超越了其在自身免疫和癌症中的传统认知，展现出在多种神经疾病治疗中的潜在价值。
Zhou等人探讨CD40-CD40L在神经疾病中的作用以及针对CD40系统的治疗进展，阐释了CD40-CD4L在多种神经疾病中的作用机制，并概述了针对CD40-CD40L系统的治疗策略，包括抑制神经炎症和增强肿瘤细胞溶解。具体来说：
创伤性脑损伤（TBI）：在TBI中，CD40和CD40L在损伤部位的巨噬细胞和小胶质细胞上表达，sCD40L被认为是TBI患者预后不良的生物标志物。
阿尔茨海默病（AD）：CD40-CD40L相互作用与炎症成分有关，影响淀粉样前体蛋白（APP）处理和tau磷酸化，促进神经纤维缠结和β-淀粉样斑块的形成。
帕金森病（PD）：CD40信号激活可导致多巴胺能神经元的选择性丢失，这可能是PD发病机制的一部分。
缺血性中风：CD40信号在动脉粥样硬化病变中与CD40共表达，且CD40L可减少动脉粥样硬化斑块的稳定性。
癫痫：血浆sCD40L水平和白细胞CD40表达显著升高，提示其在癫痫发生中的潜在作用。
中枢和周围神经损伤：CD40+小胶质细胞增加，促进CD40L+ T细胞的浸润和细胞因子介导的损伤。
多发性硬化症（MS）：CD40L表达的T细胞浸润中枢神经系统并激活小胶质细胞上的CD40受体，释放细胞因子、一氧化氮和基质金属蛋白酶，增加脱髓鞘。
肌萎缩侧索硬化症（ALS）：CD40信号上调，促使开发针对CD40L的单克隆抗体，该抗体在小鼠模型中延迟了瘫痪的发作并延长了生存期。
重症肌无力（MG）：CD40信号对于B细胞激活和抗原特异性抗体产生是必需的，CD40L基因敲除小鼠对MG诱导完全抵抗。
脑肿瘤：CD40/CD40L轴在原发性和继发性脑肿瘤的进展和治疗中起着作用，CD40/CD40L表达增加与良好预后相关，但也有研究表明CD40表达与患者生存负相关。
基于上述研究发现，科学家们提出了两种主要的治疗策略：
抑制CD40介导的神经炎症：大多数用于治疗自身免疫和神经炎症疾病的CD40疗法是针对CD40或CD40L的拮抗性单克隆抗体，可以单独使用或与其他抗体、化疗药物和/或皮质类固醇联合使用。
利用CD40介导的炎症细胞募集增强肿瘤溶解：CD40结合启动B和T细胞的抗原特异性激活，连接先天和适应性免疫，激活自然杀伤细胞以杀死肿瘤，并增强抗原呈递细胞如巨噬细胞的抗原呈递和共刺激能力。
CD40–CD40L通路的作用
CD40/CD40L通路的深入研究为多种疾病的治疗提供了新的思路和策略。随着对这一通路认识的不断深化，我们正逐步揭开其在免疫调节中所扮演的角色，并探索其在临床治疗中的潜力。全球范围内的药企正通过不懈的努力，推动CD40/CD40L靶向药物的研发，以期为患者带来更有效、更安全的治疗选择。
验证数据
CD40 Ligand蛋白天然结构及高纯度（＞95%）经SEC-MALS验证
CD40与CD40 Ligand的结合活性经ELISA验证
CD0-H5253) at 5 μg/mL (100 μL/well) can bind Biotinylated Human CD40 Ligand Protein, Avitag,His,Flag Tag with a linear range of 0.1-2 ng/mL (QC tested).
Immobilized Biotinylated Human CD40 Ligand Protein, Avitag,His,Flag Tag (Cat. No. CDL-H82Db) at 1 μg/mL (100 μL/well) on streptavidin precoated (0.5 μg/well) plate can bind Human CD40 Protein, Fc Tag (Cat. No. CD0-H5253) with a linear range of 0.5-8 ng/mL (Routinely tested).
CD40与CD40 Ligand的结合活性经BLI验证
CD40与CD40 Ligand的结合活性经FACS验证
FACS analysis shows that Human CD40 Ligand Protein, Fc Tag, premium grade can bind to 293T-CD40 cells surface CD40. The concentration of Human CD40 Ligand is 0.3 μg/mL (Routinely tested).
FACS analysis shows that Biotinylated Human CD40 Protein, Avitag,His Tag can bind to 293T cells overexpressing human CD40L. The concentration of Biotinylated Human CD40 is 3 μg/mL (Routinely tested).
FACS验证CD40 Ligand可刺激B细胞分泌IL-6
来源：新浪财经