摘要：MUC1（黏蛋白1）是一种高度糖基化的跨膜蛋白，在乳腺癌、胰腺癌等多种实体瘤中异常高表达，并通过抑制凋亡、促进免疫逃逸等机制驱动肿瘤进展。传统抗体多靶向MUC1的远端膜末端（MUC1-N），但其易在肿瘤微环境中脱落，导致抗体无法有效结合靶点，疗效受限。相比之下
MUC1（黏蛋白1）是一种高度糖基化的跨膜蛋白，在乳腺癌、胰腺癌等多种实体瘤中异常高表达，并通过抑制凋亡、促进免疫逃逸等机制驱动肿瘤进展。传统抗体多靶向MUC1的远端膜末端（MUC1-N），但其易在肿瘤微环境中脱落，导致抗体无法有效结合靶点，疗效受限。相比之下，MUC1的近膜末端（MUC1-C）直接参与肿瘤信号传导，且结构稳定，成为更具潜力的治疗靶点。然而，现有抗体（如hMUC1-1H7）多为鼠源或人源化抗体，存在免疫原性风险，且跨物种反应性不足，难以满足临床前评价需求。
近期来自安徽中医药大学和百奥赛图（北京）医药科技股份有限公司的科学家们发表在《International Immunopharmacology》的研究中，利用通过基因工程改造的RenLite KO小鼠（全人源抗体小鼠模型），结合Beacon® 单B细胞抗体发现技术，成功开发出靶向MUC1近膜末端的高亲和力全人源抗体，为肿瘤精准治疗提供了新策略。
MUC1在肿瘤中的关键作用
MUC1是一种由多种上皮细胞分泌的大型糖蛋白，它在黏膜表面形成保护层，起到润滑和保护作用。然而，在肿瘤细胞中，MUC1的表达和糖基化模式发生异常，导致其在肿瘤的发生、发展、免疫逃逸和化疗抗性中扮演重要角色。MUC1的结构包括一个较长的N端亚基（MUC1-N）和一个较短的C端亚基（MUC1-C），二者通过非共价键连接。MUC1-N上存在多个串联重复序列（VNTR），而MUC1-C则包含多个潜在的信号通路，对细胞生长具有重要影响。以往开发的MUC1抗体多针对MUC1-N的串联重复序列，但由于MUC1-N在细胞表面容易脱落，这些抗体在肿瘤治疗中的效果受限。因此，开发针对MUC1-C或MUC1近膜端的抗体具有更大的医学价值。
高亲和力、高特异性的全人源抗体
研究人员利用Beacon®单B细胞抗体发现技术，从免疫后的RenLite小鼠中筛选出40种具有人猴交叉反应性的抗体。这些抗体对乳腺癌细胞系具有高度特异性，亲和力范围在1.04E-07至2.91E-09之间。其中，具有IGHV4-5901和IGHV3-3003胚系基因的抗体表现出纳摩尔级别的高亲和力，并在乳腺癌细胞中展现出显著的内吞效果。特别是，Ab.07（IGHV3-30*03）与单甲基奥瑞他汀E（MMAE）偶联后，在多种肿瘤细胞中表现出良好的抗肿瘤活性。
图1. 肿瘤杀伤实验：（A）MUC1裸抗体不影响T-47D肿瘤细胞增殖。（B-D）Ab.07-MMAE抗体偶联药对乳腺癌细胞系T-47D、前列腺癌细胞系Du-145和非小细胞肺癌NCI-H2228表现出良好的抗肿瘤活性。（E）在抗体浓度为10 μg/ml时，肿瘤存活率分别为50.59%、34.07%和61.27%。
研究亮点
RenLite KO小鼠与Beacon®单B细胞抗体
发现技术的高效协同
1、RenLite KO小鼠的构建与免疫策略
RenLite KO小鼠基于百奥赛图的RenMice技术平台，其特点包括：
全人源抗体基因替换：小鼠重链可变区基因原位替换为人源基因，轻链固定为单一可变区基因，确保抗体多样性与人源兼容性。靶向抗原设计：选择MUC1近膜末端1043-1155区段作为免疫原，该区域在人源与食蟹猴间同源性达89%，可诱导交叉反应性抗体。交叉免疫方案：通过人源与猴源MUC1蛋白交替免疫，结合CHO-S细胞表达的抗原表位，激活小鼠B细胞的高效应答。图2. RenLite KO小鼠免疫周期和流程
2、Beacon®单细胞光导系统的应用
Beacon®单B细胞抗体发现技术在本研究中发挥了关键作用，其优势体现在：
精准筛选：利用荧光标记的MUC1抗原蛋白（hMUC1(1043-1155)-FC）及抗原细胞（CHO-S-hMUC1(1043-1255)），Beacon®系统可实时鉴别分泌目标抗体的B细胞。高效性与多样性：单次实验可筛选数万个B细胞，直接克隆天然配对的抗体基因，避免体外重组导致的多样性丢失。短周期开发：传统杂交瘤技术需数月，而Beacon®结合单细胞测序，可在3周内完成抗体基因克隆与功能验证，显著加速研发进程。图3. Beacon®针对可溶性MUC1抗原和MUC1过表达报告细胞系的单B细胞高通量快速筛选
结语
本研究通过RenLite KO小鼠与Beacon®单B细胞抗体发现技术的结合，成功开发出靶向MUC1近膜末端的高质量全人源抗体，填补了传统疗法的空白，为耐药性肿瘤提供新选择。该策略可扩展至其他跨膜蛋白靶点（如EGFR、HER3），加速实体瘤抗体药物开发。筛选抗体可灵活构建双特异性抗体（BsAbs）或双抗ADC（BsADCs），实现“1+1>2”的效果。Beacon技术的高效筛选能力与RenLite小鼠的稳定抗体生产体系，为大规模抗体发现提供了标准化流程。未来，这一平台技术有望推动更多靶向药物的快速转化，引领抗体疗法进入高效、精准的新时代。
来源：老齐的科学讲堂
