摘要：细菌内毒素检测是生物制药质量控制的关键环节，传统方法主要依赖鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate, LAL）。然而，LAL依赖鲎血资源，面临供应链不稳定、动物伦理争议及潜在干扰（如β-葡聚糖激活Factor G通路）等问题。重组C因子（Re
转自：ACROBiosystems官方
背景
细菌内毒素检测是生物制药质量控制的关键环节，传统方法主要依赖鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate, LAL）。然而，LAL依赖鲎血资源，面临供应链不稳定、动物伦理争议及潜在干扰（如β-葡聚糖激活Factor G通路）等问题。重组C因子（Recombinant Factor C, rFC）作为非动物源性替代方法，通过基因工程技术表达鲎C因子蛋白，仅特异性识别内毒素脂多糖（LPS），避免了鲎试剂的旁路干扰，近年来逐渐被全球药典和监管机构认可。
方法性能与可比性研究
01
灵敏度与一致性
多项研究表明，重组C因子与LAL在检测灵敏度上具有高度可比性,例如：针对非饮用水、清洁蒸汽和注射用水样本，重组C因子与鲎试剂的检测结果均在50-150%的回收率范围内，且对注射用水和清洁蒸汽样本的未检出率一致,以及测试41例水污染菌株样本，重组C因子与鲎试剂的检测结果一致性达87.8%，与LAL试剂间的差异（92.7%）相当。
02
抗干扰能力
重组C因子仅利用Factor C通路，不受旁路因子干扰，避免伪阳性结果，显著优于鲎试剂。此外，重组C因子方法更适合检测复杂样本。在疫苗生产过程中，含高浓度内毒素的中间产物（如大肠杆菌表达的重组蛋白）常因蛋白酶或去污剂干扰鲎试剂检测，而重组C因子通过优化前处理（如稀释）能够准确量化内毒素。
03
定量与趋势分析
在光度法（如动态显色法）中，重组C因子与鲎试剂的定量结果相关性高（R²>0.98），均适用于工艺监控和趋势分析。研究表明，在低营养环境（如M9培养基）中生长的菌株,重组C因子检测法仍能稳定检测该类污染，而鲎试剂在此类样本中因基质复杂性则可能需要更高的稀释倍数。
法规与验证要求
01
全球药典进展
欧洲药典（Ph. Eur.）：2021年正式收录重组C因子方法（Chapter 2.6.32），允许其作为独立检测标准。
美国药典（USP）：2023年发布Chapter ，明确重组C因子作为替代方法，通过验证（如干扰试验、标准曲线线性）证明适用性。
中国药典（ChP）：正在推进重组C因子方法协调，验证准确性、精密度等参数等效或优于鲎试剂。
02
验证关键点
干扰试验：需验证样本在最大有效稀释度（MVD）下的回收率（50-200%），若存在干扰（如低内毒素掩蔽），需优化前处理（如超滤、添加螯合剂等）。
可比性协议：根据USP ，更换试剂供应商或方法（如凝胶法换为显色法）需提交可比性数据，FDA将此类变更归类为“CBE-0”或“CBE-30”申报。
重组C因子应用优势
供应链稳定性：重组C因子依赖生物合成，规避鲎资源限制，符合3R原则（替代、减少、优化动物使用）。
特异性高：避免β-葡聚糖、真菌多糖等非内毒素干扰，适用于含植物提取物或纤维素过滤的样本。
监管支持：欧洲已将其列为法定方法，FDA鼓励在早期临床中优先使用以减少风险。
未来展望
重组C因子（rFC）在灵敏度、特异性和可持续性反方面显著优于传统鲎试剂，尤其适用于复杂样本和全球化生产需求。随着更多临床数据的积累，重组C因子有望逐步取代LAL成为主流方法。美国药典和欧洲药典正推动全球药典协调，预计2025年后实现方法统一。重组C因子技术优势与监管趋势已为其广泛应用奠定基础，未来有望成为内毒素检测的核心方法，为复杂生物制剂（如细胞疗法）的内毒素控制提供更优解决方案。
· 重组C因子解决方案 ·
ACROBiosystems基于自主研发的内部平台，重磅推出基于终点荧光测定的重组C因子内毒素检测试剂盒（Cat. NO. RES-A056），可以快速、有效地检测样本中的细菌内毒素，检测结果与LAL方法相当，确保检测结果的高灵敏度、高特异性、高批间一致性。该试剂盒专为制药、医疗器械及生物制品等行业设计，旨在满足这些行业对内毒素检测的严格质量控制要求。
验证数据
高灵敏度，检测结果与LAL方法相当
Different methods were used to detect endotoxin residues in five samples, and the deviation between the detection results of rFC method and LAL method is within 2 times.
来源：新浪财经