犯愁蛋白纯化中核酸残留?逐典生物核酸酶,定有一款击中你的心趴

360影视 2024-12-20 22:19 4

摘要:亲和层析,是一种利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合作用而进行分离的层析技术。比如酶与底物、抗原和抗体之间专一的相互作用等,将其一作为配基固定在填料上,就可以从初始样品中吸附相应的生物分子,然后通过合适的洗脱将其解离达到纯化的目的。凝胶过滤,也叫分子排阻

一、蛋白纯化知多少:常见蛋白纯化方法概览

亲和层析,是一种利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合作用而进行分离的层析技术。比如酶与底物、抗原和抗体之间专一的相互作用等,将其一作为配基固定在填料上,就可以从初始样品中吸附相应的生物分子,然后通过合适的洗脱将其解离达到纯化的目的。凝胶过滤,也叫分子排阻层析,是利用带孔凝胶珠作基质,按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。它还广泛地应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等,测定蛋白质的分子量也是它的重要应用之一。盐析也是蛋白质分离纯化中经常使用的方法,其原理是增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低。聚丙烯酰胺凝胶电泳同样是常用的方法之一,主要用于分离蛋白质和寡糖核苷酸。

这些不同的蛋白纯化方法各有特点,在实际应用中往往需要根据具体的需求和蛋白的特性等因素来选择使用或者联合使用。

二、全能核酸酶大揭秘

(一)全能核酸酶的基本特性

全能核酸酶,又称广谱核酸酶、超级核酸酶或活性核酸酶,是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特异性核酸内切酶。

(二)全能核酸酶的作用原理

全能核酸酶对核酸进行降解的原理是通过其特定的酶活性作用于核酸分子内部的磷酸二酯键。它作为一种内切酶,能够识别并结合到核酸链上,然后在链内合适的位置进行切割,不管是 DNA 还是 RNA,也无论它们呈现出何种具体的结构形态,如双链的稳定结构,或是单链的相对灵活形态,亦或是环状、线状等不同拓扑结构,实现诸如降低溶液粘度、去除核酸干扰等一系列在蛋白纯化等应用场景中所需要达成的目的。

三、全能核酸酶在蛋白纯化中的应用场景

重组蛋白纯化时去除核酸污染配合裂解液提升蛋白产量在病毒载体制备中确保核酸去除防止外周血单细胞结块现象

逐典生物依托重组蛋白定向改造平台,基于AI酶进化能力,成功开发多款全能核酸酶,酶活性高,终产物回收率高,能够特异性适配不同应用场景,在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,有效去除宿主残留核酸,保证生物制品功效及安全性。

产品特点

高酶活性:中、高盐缓冲液条件下,酶活性高高回收率:高盐环境下减少核酸缠绕病毒或目的蛋白,降低AAV等病毒颗粒聚集,提高目的产物回收率高工艺简便性:下游收获或纯化无需超滤换液或透析脱盐

性能验证数据

Pannarase全能核酸酶

图1.Pannarase全能核酸酶酶切数据

Pannarase耐高盐全能核酸酶

Pannarase在150 mM Na+浓度条件下酶活性最高,300 mM时仍有36.2%的活性

图2.Pannarase耐高盐全能核酸酶耐盐曲线

图3.Pannarase耐高盐全能核酸酶酶切数据

Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型

Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型在600~700 mM Na+浓度条件下酶活性最高

图4.Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型耐盐曲线

图5.Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型酶切数据

【关于逐典】

上海逐典生物科技有限公司,坐落于中国(上海)自由贸易试验区,获得ISO9001质量体系认证,是一家从事重组蛋白研发和销售的高新科技企业。

逐典生物始终秉持以客户为中心的理念,针对重组蛋白的结构设计、纯化工艺及其稳定剂型相关的多项关键技术进行优化。专业定向蛋白变复性技术,可将大肠杆菌大量表达的变性固体蛋白转变成高活性可溶性蛋白。凭借技术优势,逐典生物新品研发周期短且可控性强,为重组蛋白的高质高效研发提供保障,为企业生产降本增效。

公司自成立以来成功开发百余种高活性细胞因子及多种高活性蛋白酶,覆盖细胞培养、病毒纯化以及质量分析等生物工艺各个环节。可广泛应用于科研、医药生产及IVD(体外诊断试剂)等领域,满足各类用户所需。

来源:老高的科学讲堂

相关推荐